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          我司推薦:細(xì)菌抗酸染色法和細(xì)菌奈瑟染色法
          更新時(shí)間:2020-04-01   點(diǎn)擊次數(shù):1409次

          細(xì)菌抗酸染色法
          1、原理與應(yīng)用
          結(jié)核分枝桿菌對苯胺染料一般不易著色,若加溫或延長染色時(shí)間使其著色后,再用3%鹽酸酒精處理也不易脫色,經(jīng)此染色后,結(jié)核分枝桿菌及其他分枝桿菌呈紅色,而非抗酸菌和細(xì)胞雜質(zhì)等呈藍(lán)色。
          2、材料
          (1)結(jié)核病人痰
          (2)抗酸染色液
          (3)玻片、片夾、濾紙片、竹簽、空平皿、污物盆。
          3、方法
          (1)取潔凈的竹簽沾取痰中血絲或膿性痰,在清潔無油脂玻片上涂開。涂抹區(qū)約拇指蓋大。用過的竹簽放到空平皿內(nèi)待高壓滅菌。
          (2)涂片自然干燥后,用片夾挾住玻片一端,通過火焰固定。
          (3)涂抹面用濾紙片蓋上,然后往濾紙片上滴加石炭酸復(fù)紅染液,使濾紙片*被染液浸濕,持玻片在小火上加溫片刻然后離開火焰,此時(shí)可見到玻片上冒出蒸氣。待蒸氣消失后再加溫,如此反復(fù)3~4次,約5min,加溫時(shí)隨時(shí)添加染液勿使紙片干涸。
          (4)玻片冷卻后,用接種環(huán)挑去濾紙扔到污物盆內(nèi),流水沖洗玻片。
          (5)滴加3%鹽酸酒精脫色,至涂抹均勻部位基本沒有紅色再脫下為止,水洗。
          (6)滴加呂氏美藍(lán)染液30sec,水洗。
          (7)吸干、鏡檢。
          4、溶液配制
          萋-尼(Zichl-Neelsen)抗酸染色液
          (1)石炭酸復(fù)紅液:鹼性復(fù)紅4g,溶于95%酒精100ml,作成飽和溶液,再取該飽和液10ml與5%石炭酸溶液90ml混勻即成。
          濃鹽酸3ml加入95%酒精97ml中即成。
          (3)呂(Loeffer)氏美藍(lán)染色液
          美藍(lán)2g,溶于95%酒精100ml中,作成飽和液。再取該飽和液30ml與0.01%氫氧化鉀水溶液100ml混合均勻即可。
          細(xì)菌奈瑟染色法
          1、材料
          (1)染液甲
          液:美蘭1g,95%酒精30ml,冰醋酸50ml,蒸餾水100ml。
          第二液:結(jié)晶紫1g, 95%酒精10ml, 蒸餾水300ml。
          以上液二份,與第二液一份混合之。
          (2)染液乙,黃叱精1或2g,熱蒸餾水300ml,待溶解后過濾。
          2、染色法
          (1)涂片按常規(guī)法固定后,滴加奈瑟染液甲液數(shù)滴于涂片上,15~30 Sec,水洗。
          (2)用奈瑟染液乙液復(fù)染10~30秒鐘。
          (3)迅速用水洗,吸干、鏡檢。
          3、結(jié)果
          菌體呈鮮明、異染顆粒呈深紫蘭色。
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