J774A.1小鼠單核巨噬細(xì)胞培養(yǎng)方法

J774A.1小鼠單核巨噬細(xì)胞培養(yǎng)方法公司由多名留學(xué)歸國(guó)博士和生物科技領(lǐng)域精英聯(lián)合創(chuàng)建，坐落于美麗的大都市上海，公司堅(jiān)守“以客戶(hù)為中心、以?shī)^斗者為本"的原則，秉承“創(chuàng)新、共享"的發(fā)展理念，以達(dá)到客戶(hù)對(duì)“產(chǎn)品質(zhì)量的滿(mǎn)意，技術(shù)的滿(mǎn)意，售后服務(wù)的滿(mǎn)意 "為目標(biāo)，確保每一位用戶(hù)都能獲得更卓yue的體驗(yàn)。

傳代方法：細(xì)胞*匯合時(shí)，倒掉舊液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉胰酶，加培養(yǎng)基混勻分瓶，T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml，T75瓶加培養(yǎng)基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養(yǎng)。

培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一，可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來(lái)，故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段，同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。

無(wú)菌操作：

1. 用紫外燈照射臺(tái)子。

2. 用的器材*滅菌包裝好。

3. 在酒精燈附近操作（不能太靠近）。

4. 帶一次性無(wú)菌手套，避免袖子或手上的細(xì)菌掉入培養(yǎng)基或細(xì)胞內(nèi) 。

注意事項(xiàng)

1. 收到細(xì)胞后首先觀(guān)察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀(guān)察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活 力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì)胞匯合度80%左右時(shí)正常傳代。

5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通交流，由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

購(gòu)買(mǎi)注意細(xì)節(jié)：

1、先咨詢(xún)一下J774A.1小鼠單核巨噬細(xì)胞培養(yǎng)方法，所買(mǎi)的細(xì)胞是用的什么培養(yǎng)基以及什么血清，先準(zhǔn)備好，也用同樣的培養(yǎng)基。

2、必要時(shí)索取所買(mǎi)細(xì)胞的一些技術(shù)資料。

3、要忘了問(wèn)一些培養(yǎng)所買(mǎi)細(xì)胞的一些生長(zhǎng)特性，細(xì)胞來(lái)源，細(xì)胞代數(shù)，細(xì)胞生長(zhǎng)快慢大約多少天可以傳代等。