J774A.1小鼠單核巨噬細胞培養方法

J774A.1小鼠單核巨噬細胞培養方法公司由多名留學歸國博士和生物科技領域精英聯合創建，坐落于美麗的大都市上海，公司堅守“以客戶為中心、以奮斗者為本"的原則，秉承“創新、共享"的發展理念，以達到客戶對“產品質量的滿意，技術的滿意，售后服務的滿意 "為目標，確保每一位用戶都能獲得更卓yue的體驗。

傳代方法：細胞*匯合時，倒掉舊液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶，加培養基混勻分瓶，T25瓶中加培養基至6-8ml，T75瓶加培養基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養。

培養是生物學和醫學研究zui常用的手段之一，可分為原代培養和傳代培養兩種。原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養。由于細胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段，同時也為以后傳代培養創造條件。

無菌操作：

1. 用紫外燈照射臺子。

2. 用的器材*滅菌包裝好。

3. 在酒精燈附近操作（不能太靠近）。

4. 帶一次性無菌手套，避免袖子或手上的細菌掉入培養基或細胞內 。

注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。

4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待細胞匯合度80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養，培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通交流，由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

購買注意細節：

1、先咨詢一下J774A.1小鼠單核巨噬細胞培養方法，所買的細胞是用的什么培養基以及什么血清，先準備好，也用同樣的培養基。

2、必要時索取所買細胞的一些技術資料。

3、要忘了問一些培養所買細胞的一些生長特性，細胞來源，細胞代數，細胞生長快慢大約多少天可以傳代等。